跨膜細(xì)胞電阻儀(如MillicellERS、EVOM、MERS系列)的日常維護(hù)核心是電極清潔/防干/防腐蝕、儀器自檢校準(zhǔn)、環(huán)境與存放控制、常見(jiàn)問(wèn)題預(yù)防,重點(diǎn)保護(hù)鍍金/銀電極敏感面,避免污染、干燥與機(jī)械損傷。
一、每次使用后(必做)
1.電極清潔(最關(guān)鍵)
立即用無(wú)菌PBS或超純水輕柔沖洗電極尖端(叉指/銀球區(qū)),沖掉培養(yǎng)基、細(xì)胞碎片、蛋白殘留。
頑固蛋白/污漬:用70%乙醇浸泡5–10min,軟毛刷輕刷(嚴(yán)禁硬物刮擦);或用專(zhuān)用電極清潔液,之后用超純水徹底沖凈。
禁忌:強(qiáng)酸/強(qiáng)堿/含氯消毒劑、高壓滅菌、灼燒,會(huì)腐蝕鍍金層/銀氯化物涂層,導(dǎo)致漂移、不穩(wěn)或失效。
避免手觸電極敏感面,防止油脂污染。
2.電極短期存放(≤7天)
清潔后浸泡在無(wú)菌PBS或0.15MNaCl/KCl中(液面沒(méi)過(guò)尖端),絕對(duì)禁止干燥,否則電極不可逆氧化/硫化。
置于4℃冷藏,密封防污染。
3.主機(jī)與線(xiàn)纜
關(guān)閉電源,拔電極與電源線(xiàn);用70%乙醇擦拭主機(jī)外殼、電極線(xiàn)纜(避開(kāi)接頭),去除灰塵與培養(yǎng)液殘留。
線(xiàn)纜整理:避免彎折、重壓,防止內(nèi)部斷線(xiàn)。
二、每日/每周維護(hù)
1.環(huán)境檢查
溫度:15–30℃;濕度:30%–70%,避免冷凝與靜電。
遠(yuǎn)離強(qiáng)磁場(chǎng)(離心機(jī)、磁力攪拌器)、振動(dòng)源、陽(yáng)光直射,防止讀數(shù)漂移與干擾。
2.儀器自檢與性能驗(yàn)證(每周1次)
零點(diǎn)校準(zhǔn):開(kāi)機(jī)空載,電阻檔歸零;漂移則調(diào)“Zero”電位器。
標(biāo)準(zhǔn)電阻自檢:按“PushtoCheck”,內(nèi)置1000Ω標(biāo)準(zhǔn)電阻讀數(shù)應(yīng)1000±10Ω(2k檔)/1.00±0.01kΩ(20k檔),偏差大則換電池或校準(zhǔn)。
空白電阻驗(yàn)證:空Transwell小室(無(wú)細(xì)胞)測(cè)3次,CV<5%,否則清潔電極或換小室。
3.電極狀態(tài)檢查
目視:尖端無(wú)劃痕、鍍金層無(wú)脫落、銀球無(wú)發(fā)黑(硫化)、線(xiàn)纜無(wú)破損。
功能:讀數(shù)不穩(wěn)、漂移、數(shù)值異常低/高,優(yōu)先清潔電極;無(wú)效則考慮重新氯化或更換。
三、每月/定期維護(hù)
1.電極深度清潔與消毒
每月1次:70%乙醇浸泡10min→超純水沖凈→PBS浸泡平衡30min再用。
銀電極(如STX2)發(fā)黑:可重新氯化(稀釋漂白水浸3min,僅尖端),之后徹底沖凈;或用600級(jí)細(xì)砂紙輕磨銀球內(nèi)側(cè)(謹(jǐn)慎操作)。
2.校準(zhǔn)(每3個(gè)月1次;高頻使用/數(shù)據(jù)異常立即校準(zhǔn))
用原廠標(biāo)準(zhǔn)電阻模塊,進(jìn)入校準(zhǔn)模式,按說(shuō)明書(shū)完成校準(zhǔn)。
合格標(biāo)準(zhǔn):標(biāo)準(zhǔn)電阻(100Ω)測(cè)量誤差<2%;偏差>5%聯(lián)系售后。
3.電池檢查與更換
便攜式機(jī)型:電池電壓不足會(huì)導(dǎo)致漂移、讀數(shù)不穩(wěn)、自檢失?。欢ㄆ诟鼡Q9V電池(堿性電池優(yōu)先)。
4.長(zhǎng)期存放(>7天)
電極:清潔→超純水沖凈→徹底干燥→放入專(zhuān)用保護(hù)盒(含干燥劑),室溫防塵防潮保存。
主機(jī):斷電,干燥處存放,避免潮濕與灰塵進(jìn)入接口。
四、常見(jiàn)問(wèn)題與預(yù)防
表格
現(xiàn)象常見(jiàn)原因預(yù)防/處理
讀數(shù)漂移/不穩(wěn)電極污染、干燥、氣泡、溫度波動(dòng)每次用后沖洗防干;測(cè)量前平衡15min;輕敲除氣泡
TEER值異常低細(xì)胞單層未形成/破損、電極污染、小室漏液顯微鏡檢查細(xì)胞;清潔電極;換小室
讀數(shù)偏高/超量程電極蛋白沉積、尖端觸碰細(xì)胞層、鹽橋異常深度清潔電極;提升電極避免觸碰;檢查鹽橋
負(fù)值/亂碼電極反接、空白未校準(zhǔn)、接口松動(dòng)核對(duì)電極方向;重新空白校準(zhǔn);緊固接口
五、關(guān)鍵禁忌與注意
?禁止高壓滅菌、灼燒、強(qiáng)酸/強(qiáng)堿清潔電極。
?禁止電極干燥存放(短期必須浸泡)。
?禁止手觸電極敏感面、硬物刮擦尖端。
?測(cè)量前電極在PBS/培養(yǎng)液中平衡15–30min,減少漂移。
?定期備份數(shù)據(jù),記錄維護(hù)與校準(zhǔn)日志,便于追溯。